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CCK-8試劑盒安穩(wěn)、易保留、操作簡練
更新時(shí)間:2021-12-09 點(diǎn)擊次數(shù):1652次
  CCK-8試劑盒是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的試劑盒,其試劑安穩(wěn)、易保留、操作簡練、作用區(qū)分客觀等要素,適宜于大規(guī)模篩查實(shí)驗(yàn)又能夠用于少數(shù)標(biāo)本的檢查,能夠做定性實(shí)驗(yàn)也能夠做定量分析。
  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
  CCK-8試劑盒的實(shí)驗(yàn)小貼士:
  1、在收到試劑盒后,為保證檢測效果,需要根據(jù)說明書中保存條件正確儲(chǔ)存。除非特別注明,試劑盒大多是在2~8°C條件下儲(chǔ)存;
  2、在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,請(qǐng)確認(rèn)包裝中的試劑盒成分與說明書一致,再進(jìn)行后續(xù)操作;
  3、溶解標(biāo)準(zhǔn)品過程中,注意標(biāo)準(zhǔn)品是否受潮,過程中要避免產(chǎn)生泡沫;
  4、為了避免交叉污染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽;
  5、每次孵育時(shí),正確使用封板膠紙可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性;
  6、正確洗板有助于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性;
  7、TMB顯色底物在上板前應(yīng)為無色,請(qǐng)避光保存。加入孔板后,將由無色變成不同程度的藍(lán)色;
  8、終止液上板順序需與底物上板順序一致,加入終止液,溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果出現(xiàn)綠色,即表明終止液與底物未混勻,請(qǐng)充分混合。

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