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乙酰丁香酮的作用原理和配制方法
更新時(shí)間:2020-08-20 點(diǎn)擊次數(shù):28416次
  乙酰丁香酮是一種酚類化學(xué)物,分子式是HOC6H2(OCH3)2COCH3。 類白色或淺褐色粉末或結(jié)晶,溶于CH2Cl2 ,參考濃度25mg/ml或2.5%。可誘導(dǎo)膿桿菌Vir基因的活化,從而促進(jìn)外源基因的整合。作用機(jī)理是通過(guò)誘導(dǎo)農(nóng)桿菌Vir區(qū)基因的活化與表達(dá),促進(jìn)T-DNA的加工與轉(zhuǎn)移,從而促使農(nóng)桿菌T-DNA更容易進(jìn)入植物基因組并與其整合。
  乙酰丁香酮作用原理:
  可誘導(dǎo)農(nóng)桿菌Vir基因活化,從而促進(jìn)外源基因的整合。所以好讓其有一定的誘導(dǎo)時(shí)間再轉(zhuǎn)化,效果要好些,而不是加完后直接轉(zhuǎn)化(需要活化)。
  As作為誘導(dǎo)性好的酚類化合物,其作用機(jī)理主要是通過(guò)誘導(dǎo)農(nóng)桿菌Vir區(qū)基因的活化與表達(dá),促進(jìn)T-DNA的加工與轉(zhuǎn)移,從而使農(nóng)桿菌T-DNA更易進(jìn)入植物基因組并與其整合。農(nóng)桿菌Ti或Ri質(zhì)粒的Vir區(qū)編碼產(chǎn)物負(fù)責(zé)接收外界信號(hào)、T-DNA的加工、轉(zhuǎn)移及整合等功能,對(duì)菌種的侵染力起決定性的作用。農(nóng)桿菌在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)繁殖時(shí),所有的Vir區(qū)基因均處于非轉(zhuǎn)錄活性狀態(tài),這些基因接受As等信號(hào)分子后便開(kāi)始轉(zhuǎn)錄活化。
  乙酰丁香酮的配制方法:
  1,用于擬南芥花侵染的,配制使用的容積為DMSO,母液為100mM,使用濃度請(qǐng)參照相關(guān)文獻(xiàn)。
  2,另外一種是用于愈傷組織的侵染,是用少量甲醇溶解后,再用蒸餾水定容。之后過(guò)濾除菌。顯然兩者溶劑不一樣,不過(guò)建議還是使用DMSO。
  乙酰丁香酮使用方法:
  一般使用終濃度為100-200 umol/L。可用DMSO溶解,配置1M母液,分裝-20度保存。轉(zhuǎn)化前,將乙酰丁香酮加入轉(zhuǎn)化緩沖液,冰上放置約1 h后即可使用。
  貯存條件:密封室溫保存。

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號(hào)

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